本试验测试了日粮中添加肠杆菌肽对肉鸡的影响，表明肠杆菌肽可以提高生长性能，改善肠道形态，减轻炎症，并影响粪便微生物区系组成。证明了肠杆菌肽是优秀的抗生素替代物。
肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌攻毒条件下肉鸡生长性能、免疫调节和肠道菌群的影响
本研究旨在探讨肠杆菌肽对肉仔鸡生长性能、免疫调节和肠道微生物区系的影响。试验选用1日龄AA肉鸡（公鸡）3120只，随机分为5组，每组12个重复，每个重复52只鸡。试验分为对照组、攻毒组、不同剂量肠杆菌肽组(0.5 mg/kg、1 mg/kg)和20 mg/kg硫酸粘菌素。与攻毒组相比，肠杆菌肽组体重增加2.6%，总体料重比显著降低4.2%，粪便中厌氧细菌总数和大肠杆菌数量减少，沙门氏菌感染率也较低，并且十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度以及十二指肠和空肠的绒隐比均大于攻毒组。此外，肠杆菌肽还能线性提高十二指肠和空肠的绒毛高度。加入肠杆菌肽后，小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度较攻毒组明显降低。第21天时，肠杆菌肽可线性降低IL-6水平。综上所述，日粮中添加肠杆菌肽有效地改善了肉仔鸡的生产性能、全身炎症反应和肠道微生物区系组成。
本研究采用完全随机设计，对3120只1日龄AA公鸡进行了为期42天的饲养试验。为了达到肉鸡的营养需要，配制了不含抗生素和不含抗球虫的玉米豆粕日粮(NRC，1994)。肉鸡随机分为5个处理组，每个处理12个重复，每个重复52只鸡。
（2）、(3)、(4)、(5)组分别在饮水中加入大肠杆菌AZ1(1×106cfu/g)和沙门氏菌CVCC519(1×106cfu/g)进行攻毒，第8天，各组均停止，给予肉鸡正常饮水。
肠杆菌肽对大肠杆菌AZ1和沙门氏菌CVCC519的最低抑菌浓度(MIC)
肠杆菌肽对大肠杆菌AZ1和沙门氏菌CVCC519的MIC值都为0.5μg/mL。对阳性对照大肠杆菌ATCC25922的最低抑菌浓度为1μg/mL（表1）。这些结果表明，肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌有较好的抑制作用。
表1：肠杆菌肽对大肠杆菌AZ1和沙门氏菌CVCC519的最低抑菌浓度(MIC)
+：细菌生长，−：细菌未生长
02
生长性能测定
与对照组相比，大肠杆菌和沙门氏菌攻毒显著降低了肉鸡的体重，显著增加了料肉比和死亡率(p＜0.05)（表2）。添加0.5 mg/kg和1 mg/kg的肠杆菌肽能显著抑制大肠杆菌和沙门氏菌对肉仔鸡生长性能的影响，降低42日龄料肉比和整个试验期的死亡率(p<0.05)，提高体重(p<0.05)（表2）。
表2：肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌感染下肉鸡生产性能的影响
03
粪便细菌计数
粪便细菌计数如图1所示。与对照组相比，在大肠杆菌和沙门氏菌攻毒7天后，粪便中的需氧细菌总数、大肠杆菌和沙门氏菌感染率显著增加(p<0.05)。第21天和第42天时，相比于攻毒组，肠杆菌肽组和抗生素组的肉鸡粪便中的大肠杆菌数和总需氧细菌显著减少(p<0.05)，但其数量高于对照组（图1）。21d时，相比于攻毒组，肠杆菌肽组和抗生素组肉鸡粪便中的乳酸菌和双歧杆菌数显著增加(p<0.05)，但沙门氏菌感染率无显著影响。42d时，相比于攻毒组，肠杆菌肽组肉鸡的粪便中双歧杆菌数量显著增加(p<0.05)，大肠杆菌和沙门氏菌数量显著降低(p<0.05)。与抗生素组相比，添加肠杆菌肽可显著降低沙门氏菌感染率(p<0.05)。
综上所述，添加肠杆菌肽可降低肉鸡肠道有害菌的数量，并提高有益菌数量。对沙门氏菌抑制效果好于硫酸粘菌素。
图1：肠杆菌肽对21日龄和42日龄肉鸡粪便中大肠杆菌、乳酸菌、双歧杆菌和需氧菌总数以及沙门氏菌感染率的影响
04
肠道形态
与对照组相比，大肠杆菌和沙门氏菌感染严重破坏了小肠的形态结构，显著降低了十二指肠和回肠的绒毛高度、隐窝深度和绒隐比以及空肠绒毛高度和绒隐比(p＜0.05)（表3）。
与攻毒组相比，添加肠杆菌肽显著增加十二指肠和空肠的绒毛高度和绒隐比（p＜0.05）。饲喂0.5 mg/kg和1 mg/kg 肠杆菌肽的雏鸡空肠绒毛高度、绒隐比和十二指肠绒毛高度均显著高于抗生素组（p＜0.05），1 mg/kg 肠杆菌肽对肠道形态损伤有较好的抑制作用。
表3：肠杆菌肽对肉鸡十二指肠、空肠和回肠绒毛高度、隐窝深度和绒隐比的影响
在肠粘膜形态上也发现类似的结果。肠道苏木精-伊红染色显示，在十二指肠和回肠被大肠杆菌和沙门氏菌攻毒后，肠道出现更广泛的损伤和更严重的炎症浸润(图2)。而肠杆菌肽和抗生素治疗可以减轻粘膜损伤(图2)。
图2：肠杆菌肽对肉鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜形态的影响
05
血清中免疫因子的浓度
肠杆菌肽对血清中免疫调节因子浓度的影响结果如图3所示。大肠杆菌和沙门氏菌攻毒组小鼠的促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量显著高于其他4组(P＜0.05)。第21天，0.5和1.0 mg/kg 肠杆菌肽组血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的水平低于攻毒组，1.0 mg/kg的肠杆菌肽组的IL-6水平低于0.5 mg/kg的肠杆菌肽组。42d时血清中IL-1β和IL-6浓度与对照组相近(p＜0.05)。并且，饲喂肠杆菌肽和抗生素日粮的肉鸡的细胞因子是相似的。
综上所述，1.0 mg/kg的肠杆菌肽抑制促炎因子效果优于0.5 mg/kg的肠杆菌肽组，且与硫酸粘菌素效果相似。
图3：肠杆菌肽对第21天和第42天血清免疫调节因子浓度的影响
总之，在大肠杆菌和沙门氏菌的攻毒条件下，肠杆菌肽促进了肉鸡的生长性能，料肉比降低4.2%，改善肠道形态，减轻炎症，并影响了粪便微生物区系组成。
参考文献：Wang G, Song Q, Huang S,et al. Effect of Antimicrobial Peptide Microcin J25 on Growth Performance, Immune Regulation, and Intestinal Microbiota in Broiler Chickens Challenged with Escherichia coli and Salmonella. Animals (Basel). 2020 Feb 21;10(2):345. doi: 10.3390/ani10020345.
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